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疏水层析填料

疏水作用层析是根据分子表面疏水性不同来分离生物大分子的一种方法。蛋白质和多肽等生物大分子的表面常常暴露着一些疏水性基团,我们把这些疏水性基团称为疏水补丁,疏水补丁可以与疏水性层析介质发生疏水性相互作用而结合。不同的分子由于疏水性不同,它们与疏水性层析介质之间的疏水性作用力强弱不同,疏水作用层析就是依据这一原理分离纯化蛋白质和多肽等生物大分子的。

选择疏水作用层析介质的关键在于选择合适的疏水强弱的配基,弱蛋白质的疏水性较强就需要选择较弱的疏水介质,反之亦然,为了增强蛋白质和疏水介质的结合需要在缓冲液中加入一定量的盐(通常是硫酸铵)。弱蛋白质本身疏水性较强,就不需要加太多的盐,为了提高分辨率可以选择颗粒较小的疏水介质。

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产品名称 规格 市场价 数量
00071-42004 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),1L 登录后查看
00071-42003 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),500mL 登录后查看
00071-42002 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),100mL 登录后查看
00071-42001 Phenyl Tanrose 6FF (High Sub),25mL 登录后查看
00071-43004 Phenyl Tanrose 6HP,1L 登录后查看
00071-43003 Phenyl Tanrose 6HP,500mL 登录后查看
00071-43002 Phenyl Tanrose 6HP,100mL 登录后查看
00071-43001 Phenyl Tanrose 6HP,25mL 登录后查看
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00071-41003 Phenyl Tanrose 6FF (Low Sub),500mL 登录后查看
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影响疏水层析的因素

      *蛋白质的疏水性强弱取决于其表面疏水基团的分布。

      *盐的种类及浓度,组成缓冲液中盐的某些离子对蛋白质的构象有稳定作用,如 SO42- 可提高蛋白结构的稳定性,使蛋白的溶解度下降,对蛋白有盐析效应,使蛋白同配基间疏水作用增强。还有些离子对于蛋白质构象具有不稳定作用,如 Cl-、Ca2+ 可增加蛋白质的溶解度,这类离子洗脱能力较强。盐析和盐溶的特性可作为选择疏水介质平衡和洗脱条件的依据,常用的疏水配基的疏水性强弱和疏水作用离子排列如下:

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*疏水层析过程中,温度升高,疏水作用增强,有利于提高层析柱的分离度,但对于生物活性物质来说,高温条件会使其变性失活,因此疏水层析通常在常温或者低温中进行,建议维持室温。

      *疏水层析流动相的PH通常为中性的磷酸盐缓冲液。蛋白质同疏水基团的作用力随PH升高而降低,因为蛋白质的酸性基团随PH升高所带电荷逐渐增多,亲水性增强。但在疏水层析中通常不采用改变溶液的PH来改变蛋白质的疏水性。

Phenyl/Butyl/Octyl/Butyl-S Tanrose FF 快流速琼脂糖基架疏水层析介质

      Phenyl Tanrose 6FF 属于芳香族疏水介质,疏水性最强。根据配基取代程度不同分为:高取代(High Sub简称HS)和低取代(Low Sub简称LS)两种介质。苯基通过不带电,化学性质稳定的醚键连接到琼脂糖上。

      Butyl Tanrose 4FF 和Octyl Tanrose 4FF 这两种介质属于脂肪族疏水介质,Butyl Tanrose 4FF 配基为丁基,Octyl Tanrose 4FF 配基为辛基:这两种配基通过不带电且化学稳定性的醚键同高度交联的琼脂糖偶联而成。

      Butyl-S Tanrose 6FF 是疏水性最弱的疏水介质,适合在较低盐浓度条件下纯化强疏水性分子,可去除脂肪类,脂蛋白,色素等,在酵母重组表达乙肝疫苗纯化过程中发挥重要作用。

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